草莓种苗繁育技术(种苗繁育技术规程)
为了获得大量草莓无病毒苗。本试验采用4种脱毒技术先后取得了成功。
1、茎尖组织培养法
在试验中用3个品种(“明晶”、“群星”、红手套”)、3种茎尖大小(0.2mm,0.4mm,0.6mm)、3种培养基(300号、205号、202号),采用三因素、三水平正交设计L27(33),比较27个处理组合茎尖分生组织培养及脱毒情况。结果表明,接种0.2mm,0.4mm,0.6mm不同大小茎尖,其脱毒率分别可达100%、75%、62%。筛选出的最佳培养基是205号MS改良培养基,它既适于接种茎尖,又利于增殖扩繁,是一种较好的多功能培养基。
2、热处理法
用盆栽苗热处理时,为了解决高温易引起处理苗严重死亡的问题,我们采用在苗盆基部缠绕乳胶管通以自来水的根系保护变温法,降低了根际温度,延长了苗木寿命。其脱毒率可达66%,同时还得到了脱毒率转换值、存活率转换值与热处理时间的回归方程;用茎尖组培苗热处理时脱毒率可达100%。比盆栽苗热处理法简单,且脱毒效果也较好。
3、化学治疗结合组织培养法
在茎尖组织培养时分别加入化学治疗剂2-硫尿嘧啶、孔雀绿、药剂浓度为0,2×10-6kg/m3,4×10-6kg/m3。茎尖大小为0.6mm,0.8mm,1.0mm,采用二因素三水平正交设计。结果表明,2-硫尿嘧啶、孔雀绿可分别提高脱毒率6.7%~14.2%、0~4.2%,并得到了两种药剂脱毒效果,y与茎尖大小x1、药剂浓度x2的优化方程。试验中以0.6mm茎尖和4×10-6kg/m3药剂浓度组合的脱毒率效果最佳,其脱毒率可达71.4%。
4、花药培养法
在培养基上接种花药,诱导产生愈伤组织继而分化出花药苗。用指示植物EMC和UC5对花药苗进行病毒检测,结果表明,并不是所有花苗都是无毒苗,只有少数花药苗是无毒苗。而绝大多数花药苗为部分脱毒苗,极少数花药苗甚至带毒较为严重。所检出的主要病毒是草莓斑驳病毒(SM0V)、草莓和性黄边病毒(SMYEV)及草莓皱缩病毒(SCrV)等。这与国内外学者认为草莓花药苗全部为无毒苗的结论是不一致的。